阿魏酸对巨噬细胞泡沫样化过程中胆固醇流出的影响及可能机制(3)
1.7RT-PCR检测ABCA1和ABCG1的mRNA表达水平6孔板中的细胞用ox-LDL脂蛋白处理48 h后，用含不同浓度阿魏酸的培养基继续培养24 h，将巨噬细胞收集至细胞裂解液中，用TIANGEN提供的细胞总RNA抽提试剂盒提取细胞总RNA，定量后取1 μg RNA用PrimeScriptTM RT reagent kit，将RNA反转录成cDNA，然后用合成的cDNA作为模板，在ABI ViiA7上对目的基因进行定量分析。反应体系为10 μL，包括模板1 μL(1～10 ng)，引物1 μL(终浓度1×10-7 mol·L-1)，SYBR Premix Ex TaqTM 5 μL 和H2O 3 μL;反应条件为95 ℃ 30 s;95 ℃ 5 s;60 ℃ 30 s;40个循环;72 ℃ 30 s ......
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