[摘要]目的：探索理想的冷冻人脂肪间充质干细胞的方法。 方法：采用常规方法体外培养并扩增人脂肪间充质干细胞，消化细胞并洗涤离心加入10%二甲基亚砜、30%胎牛血清、60%MEM的细胞冻存体系，直接置-70℃冰箱贮存。冻存4、8和12周后，37℃水浴复温，通过检测细胞周期细胞表型和成脂的多向分化潜能，以鉴定该方法的可行性。结果：消化后不经过传统的程序性降温冻存技术，直接在-70℃冰箱赡存，其细胞生物学特性无明显改变，细胞仍存在成脂的多向分化潜能。结论：人脂肪间充质干细胞悬液直接-70℃冰箱贮存不影响其生：物学特性，是冷冻保存的一种可行方法。

    [关键词]人脂肪间充质干细胞；分化；脂肪细胞；冷冻贮存

    人脂肪间充质干细胞具有多向分化潜能，在一定的诱导条件下，可以分化为成骨、软骨、脂肪等多种细胞，是组织工程，尤其是骨或软骨组织损伤修复中重要的种子细胞。因此，对其体外分离培养、扩增及保存方法等研究具有重要的意义。人脂肪间充质干细胞分离培养周期较长，原代细胞铺满的时间约2周以上，达到实验用的数量一般需要3剧左右。我们在工作中发现，人脂肪间充质干细胞体外长期培养传代容易发生自发分化，失去其多向分化的潜能。为保证实验的连续性，随时提供大量的实验或组织工稗用的种子细胞，建立～种行之有效的方法是必要的，通过检测人脂肪间充质干细胞在冻存复苏后的细胞周期，细胞表型和成脂的多向分化潜能来鉴定冻存方法的可靠性。

    1 材料和方法

    1.1 人脂肪间充质干细胞的分离纯化及培养：脂肪组织来源于兰州军区兰州总医院美容中心行脂肪抽吸术的患者 ......