1材料和方法

    1.1 主要试剂和溶液：抗体FactorⅧ Related Antigen(购自Santa Cruz Biotechnology，Inc.)；二步法免疫组化检测试剂盒(购自北京中山生物技术有限公司)。

    1.2 主要仪器：图像分析仪(瑞典)、激光多普勒血流检测仪(美国)、激光共聚焦显微镜。

    1.3实验动物分组及模型制备

    1.3.1 实验动物及分组：选用健康雄性Wistar大鼠48只，体重0.22～0.25kg，购自军事医学科学院动物中心。将大鼠随机分为A、B两组，A组42只，为组织病理观察组，根据实验设计又分为：伤后即刻、1 天、3 天、7 天、14 天及21 天组及正常对照组，每组6只；B组6只，为血流量检测组，连续检测大鼠背部同一部位正常皮肤及伤后即刻、伤后1 天、3 天、7 天、14 天及21 天创面血流量。

    1.3.2 烫伤模型制备：将大鼠用速眠新(0.1 ml、肌注)麻醉后，背部净毛，用金属烫伤器在背部两侧分别制做一个深Ⅱ度烫伤创面(70℃、8s)，创面为圆形，直径18 mm，面积2.54 cm2。(以上致伤条件预实验已经病理切片证实)。

    1.4 标本采集与处理：A组大鼠在各时间点活杀取材(创面及周围0.5cm正常皮肤)，所取组织经10%福尔马林固定后，常规脱水、透明、浸蜡，石蜡包埋后，用于组织病理学、免疫组化检测。

    1.5检测指标及方法

    1.5.1大体观察：观察烫伤后各时间点，创面颜色、形状、大小及质地的变化。

    1.5.2 创面面积：伤后3天、7天及14天采用画膜称重法测量B组及A组剩余大鼠创面面积。用透明膜覆盖创面，沿创缘画膜，剪膜，置分度值为0.1mg的分析天平称重换算成创面面积。

    1.5.3血流量检测：采用彩色激光多普勒血流量检测仪 ......