补骨脂酚对UVB诱导HaCaT细胞凋亡因子p53和caspase—3表达的影响(2)
1.2.3细胞增长率测定：参照文献，取对数生长期细胞，接种于96孔板，培养24h，根据预实验结果，选定10-11、10-10、10-9、10-8、10、1-7、10-6、10-4及10-3mol/L九个浓度补骨脂酚加入96孔板中，继续培养24h，弃去旧培养液，继续加入新培养液培养24h，再加入20μl MTT及150μl DMSO，于492nm波长处酶标仪检测每组间细胞的吸光值。细胞增殖率=给药组OC值/空白组OD值(其值设为1)×100%。
1.2.4 ROS试剂盒检测ROS含量：取对数生长期的细胞，消化、离心，接种于6孔板后，进行分组，分别为空白组、模型组、10-7mol/L雌二醇及10-6mol/L补骨脂酚组，于37℃5%CO2培养箱中培养，72h后取出，弃掉培养液，加入1mlDCFH-DA(10μM/L)溶液，放于培养箱孵育20min，每隔5min颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。采用无血清的培养液洗涤3次，PBS清洗3次，加入胰蛋白酶进行消化，培养液终止消化，离心，放于1.5ml离心管中，加入1mlPBS重悬细胞，滤网滤过 ......
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1.2.4 ROS试剂盒检测ROS含量：取对数生长期的细胞，消化、离心，接种于6孔板后，进行分组，分别为空白组、模型组、10-7mol/L雌二醇及10-6mol/L补骨脂酚组，于37℃5%CO2培养箱中培养，72h后取出，弃掉培养液，加入1mlDCFH-DA(10μM/L)溶液，放于培养箱孵育20min，每隔5min颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。采用无血清的培养液洗涤3次，PBS清洗3次，加入胰蛋白酶进行消化，培养液终止消化，离心，放于1.5ml离心管中，加入1mlPBS重悬细胞，滤网滤过 ......
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