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编号:13568881
山柰酚抵抗对乙酰氨基酚引起的肝细胞损伤研究(2)
http://www.100md.com 2019年1月1日 《世界中医药》 20191
     细胞存活率=A(加药)-A(空白)(A(0加药)-A(空白)×100%

    1.2.4KA对APAP诱导LO2细胞损伤的影响实验分为6组,分别是空白对照组,模型组(APAP:5 mmol/L)、阳性对照组(黄芩苷,Baicalin,缩写BA:10 μmol/L)和KA低、中、高剂量3个实验组(APAP:5 mmol/L,KA:5,10,20 μmol/L)。将对数生长的LO2细胞105个/mL的密度接种于6孔板,每个孔2 mL,细胞培养箱中培养24 h,更换无血清培养基在培养箱培养12 h,确保细胞密度在70%左右,APAP和给药干预24 h,观察肝细胞形态学变化,检测上清液和LO2细胞裂解液LDH,计算LDH释放比率。

    1.2.5Western Blot检测pJNK、JNK、EndoG蛋白表达情况按照以上既定的KA对APAP诱导肝损伤的实验方法进行实验,在药物干预24 h后弃掉细胞上清液,PBS轻轻洗涤细胞3次,加入100 μL细胞裂解液(RIPA:PMSF=100∶1),用细胞刷收集细胞到1.5 mLEP管 ......
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