树突状细胞酸敏感离子通道蛋白基因表达研究(1)
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【摘要】目的检测DC细胞上是否有酸敏感离子通道(ASICs)基因表达，为之后DC细胞与ASICs关系及酸性微环境影响DC细胞功能的分子路径等研究奠定基础。方法提取DC2.4细胞的总RNA并逆转录为cDNA，以小鼠海马组织作为阳性对照，GAPDH作为内参，用针对ASIC1保守序列的引物(含限制性内切酶的酶切位点)进行PCR检测，选取ASIC1相应条带，用DpnⅠ酶切，连接到T19载体上，转染至DH5ɑ细菌中，在含有氨苄青霉素的培养基中扩增，小量提取单克隆菌群的质粒，再次用DpnⅠ酶切，将酶切产物与DC2.4细胞的PCR产物分别电泳，选择有与DC2.4细胞相同条带的菌群进行测序，并利用BLAST对测序结果与NCBI中搜索的ASIC序列进行比对。结果RT-PCR检测发现DC2.4存在与ASIC1对应mRNA相同长度的条带；测序结果证实其为ASIC1对应的mRNA序列。结论DC2.4细胞上有ASIC1对应mRNA的表达，ASIC1可能在酸性微环境影响DC细胞功能的途径中发挥作用。
【关键词】树突状细胞；酸敏感离子通道；酸性微环境
Expression of acid-sensing ion channels gene on dendritic cells YANG Qin,YAN Xiao,TAN Zheng.Tongji Medical College of Huazhong University of Science ＆ Technology,Wuhan 430000,China
【Abstract】ObjectiveTo detect whether the ASIC genes express on the DC cells ......
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